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二疫情報告和診斷2（第1頁）

（二）實驗室診斷

1.組織病理學診斷

組織病理學診斷是觀察組織學病變（或稱為顯微病變）。

有些疫病引起的大體病變不明顯或缺如，或不同疫病具有相同的解剖變化，僅靠肉眼很難做出判斷，還需作組織病理學檢查才有診斷價值，例如傳染性海綿狀腦病、雞馬立克病與白血病等。

有些病還需檢查特定的組織器官，如疑為狂犬病時應取腦海馬角組織進行包涵體檢查。

2.微生物學診斷

微生物學診斷屬于病原學診斷的範疇，是診斷動物傳染病的最重要方法，常用診斷方法和步驟如下。

（1）病料的采集：

正确采集病料是微生物學診斷的重要環節。

病料力求新鮮，最好能在瀕死時或死後數小時内采取；

應從症狀明顯、瀕死期或自然死亡而且未經治療的病例取材；

要求盡量減少雜菌污染，用具器皿應盡可能嚴格消毒。

通常可根據所懷疑病的類型和特性來決定采取哪些器官或組織。

原則上要求采取病原微生物含量多、病變明顯的部位，同時易于采取，易于保存和運送。

如果缺乏臨床資料，剖檢時又難以判斷疫病類型的可能範圍時，應比較全面地取材，例如血液、肝、脾、肺、腎、腦和淋巴結等，同時要注意帶有病變的部分。

如懷疑炭，則按規定方法取材。

（2）病料塗片、鏡檢：

通常把有顯着病變的組織器官塗片數張，進行染色、鏡檢。

此法對于一些具有特征性形态的病原菌如炭疽杆菌、鍊球菌、巴氏杆菌等可以迅即做出診斷，但對大多數傳染病來說，隻能提供初步依據或參考。

（3）分離培養和鑒定：

用人工培養方法将病原體從病料中分離出來。

分離培養細菌、真菌、螺旋體等可選擇适當的人工培養基，分離培養病毒可選用禽胚、動物或細胞組織等。

分得病原體後，再進行形态學、培養特性、動物接種（緻病性）、免疫學及分子生物學等鑒定。

（4）動物接種試驗：

有時人工培養分離到的微生物不一定是引起發病的病原體，因此需要選擇對病原體最敏感的動物進行人工感染試驗。

将病料用适當的方法處理并進行人工接種，然後根據對動物的緻病力、症狀和病理變化特點來幫助診斷。

當實驗動物死亡或經一定時間剖殺後，觀察體内變化，并采取病料進行塗片檢查和分離鑒定。

一般常用的實驗動物有家兔、小鼠、豚鼠、倉鼠、家禽、鴿子等，當實驗動物對病原體無感受性時，可以采用有易感性的本種動物進行試驗，但對于大、中型動物或特種動物因費用高，而且需要嚴格的隔離條件和消毒設施，因此隻有在必要和條件許可時才進行本種動物接種試驗。

從病料中分離出病原微生物，雖是确診的重要依據，但也應注意動物的“健康帶菌（毒）”現象，其結果還需與臨床及流行病學、病理變化結合起來進行綜合分析。有時即使沒有發現病原體，也不能完全否定該種傳染病的診斷，因為任何病原學方法都存在有漏檢的可能。

3.免疫學診斷

免疫學診斷是傳染病診斷和檢疫中最常用、最重要的診斷方法之一，它包括血清學試驗和變态反應兩大類方法。

（1）血清學試驗：

可以用已知抗原來測定被檢動物血清中的特異性抗體，也可以用已知的抗體（免疫血清）來測定被檢材料中的抗原。

免疫學方法檢測的抗原可以是完整的病原體，也可以是病原體的一部分。

根據實驗原理，血清學試驗可分為中和試驗（毒素中和試驗、病毒中和試驗等）、凝集試驗（直接凝集試驗，間接凝集試驗，間接血凝試驗、協同凝集試驗和血細胞凝集抑制試驗）、沉澱試驗（環狀沉澱試驗、瓊脂擴散沉澱試驗和免疫電泳等）、溶細胞試驗（溶菌實驗、溶血試驗）、補體結合試驗以及免疫熒光技術、免疫酶技術，放射免疫測定、單克隆抗體技術等。

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